فلوروفور

لمعلومات عن استخدمات نظرية الفلورة، انظر الفلورة في العلوم الحياتية.
A fluorophore-labeled human cell.

الفلوروفور أو المستشع fluorophore (أو الفلوروكروم، مشابه للكرومفور)، هو مركب كيميائي مفلور يمكنه إعادة بعث الضوء عند التحفيز الخفيف. عادة ما تحتوي الفلوروفورات على عدة مجموعات عطرية مركبة، أو plane or cyclic molecules with several π bonds.

تستخدم الفلوروفورات منفردة أحياناً، كمتتبع في الموائع، مثل الأصباغ لصباغة تركيبات معينة، كركيزة للإنزيمات، أو كمستكشف أو ميشر (عند تأثر فلورتها بالبيئة مثل القطبية والأيونات،...). لكنها تعتبر بشكل عام مرتبطة تساهمياً بالجزيء الضخم، حيث تعمل كدلالة (أو صبغة، أو علامة أو reporter) للكواشف الأفينية أو الحيوية النشطة (الأجسام المضادة، الپپتيدات، الأحماض النووية).

تستخدم الفلوروفورات بشكل عام في الأنسجة المصبوغة، الخلايا، المواد بطرق تحليلية متنوعة، مثل التصوير المفلور والمطيافية المفلورة.


الفلوروسين، by its amine reactive isothiocyanate derivative FITC, has been one of the most popularized fluorophores. From antibody labeling, the applications have spread to nucleic acids thanks to (FAM(Carboxyfluorescein), TET,...). Other historically common fluorophores are derivatives of rhodamine (TRITC), coumarin, and cyanine.[1] Newer generations of fluorophores, many of which are proprietary, often perform better (more photostable, brighter, and/or less pH-sensitive) than traditional dyes with comparable excitation and emission.[2][3]

. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

الفلورة

الحجم (الوزن الجزيئي)

العائلات

Bovine Pulmonary Artery Endothelial cell nuclei stained blue with DAPI, mitochondria stained red with MitoTracker Red CMXRos, and F-actin stained green with Alexa Fluor 488 phalloidin and imaged on a fluorescent microscope.

أمثلة على الفلوروفورات الشائعة

الأصباغ الارتكاسية والمتلازمة

الصبغة Ex (nm) Em (nm) MW ملاحظات
Hydroxycoumarin 325 386 331 Succinimidyl ester
Aminocoumarin 350 445 330 Succinimidyl ester
Methoxycoumarin 360 410 317 Succinimidyl ester
Cascade Blue (375);401 423 596 Hydrazide
Pacific Blue 403 455 406 Maleimide
Pacific Orange 403 551
Lucifer yellow 425 528
NBD 466 539 294 NBD-X
R-Phycoerythrin (PE) 480;565 578 240 k
PE-Cy5 conjugates 480;565;650 670 aka Cychrome, R670, Tri-Color, Quantum Red
PE-Cy7 conjugates 480;565;743 767
Red 613 480;565 613 PE-Texas Red
PerCP 490 675 35kDa Peridinin chlorophyll protein
TruRed 490,675 695 PerCP-Cy5.5 conjugate
FluorX 494 520 587 (GE Healthcare)
Fluorescein 495 519 389 FITC; pH sensitive
BODIPY-FL 503 512
Cy2 489 506 714 QY 0.12
Cy3 (512);550 570;(615) 767 QY 0.15
Cy3B 558 572;(620) 658 QY 0.67
Cy3.5 581 594;(640) 1102 QY 0.15
Cy5 (625);650 670 792 QY 0.28
Cy5.5 675 694 1128 QY 0.23
Cy7 743 767 818 QY 0.28
SeTau-647 649 695 1461 QY 0.61; Lifetime 3.2 ns
TRITC 547 572 444 TRITC
X-Rhodamine 570 576 548 XRITC
Lissamine Rhodamine B 570 590
Texas Red 589 615 625 Sulfonyl chloride
Allophycocyanin (APC) 650 660 104 k
APC-Cy7 conjugates 650;755 767 Far Red

الاختصارات:
Ex (nm): Excitation wavelength in nanometers
Em (nm): Emission wavelength in nanometers
MW: Molecular weight QY: Quantum yield

أصباغ الأحماض النووية

الصبغة Ex (nm) Em (nm) MW الهوامش
Hoechst 33342 343 483 616 AT-selective
DAPI 345 455 AT-selective
Hoechst 33258 345 478 624 AT-selective
SYTOX Blue 431 480 ~400 DNA
Chromomycin A3 445 575 CG-selective
Mithramycin 445 575
YOYO-1 491 509 1271
Ethidium Bromide 493 620 394
Acridine Orange 503 530/640 DNA/RNA
SYTOX Green 504 523 ~600 DNA
TOTO-1, TO-PRO-1 509 533 Vital stain, TOTO: Cyanine Dimer
TO-PRO: Cyanine Monomer
Thiazole Orange 510 530
CyTRAK Orange 520 615 - (Biostatus) (red excitation dark)
Propidium Iodide (PI) 536 617 668.4
LDS 751 543;590 712;607 472 DNA (543ex/712em), RNA (590ex/607em)
7-AAD 546 647 7-aminoactinomycin D, CG-selective
SYTOX Orange 547 570 ~500 DNA
TOTO-3, TO-PRO-3 642 661
DRAQ5 600/647 697 413 (Biostatus) (usable excitation down to 488)
DRAQ7 599/644 694 ~700 (Biostatus) (usable excitation down to 488)

أصباغ وظيفة الخلية

الصبغة Ex (nm) Em (nm) MW ملاحظات
Indo-1 361/330 490/405 1010 AM ester, low/high calcium (Ca2+)
Fluo-3 506 526 855 AM ester. pH > 6
Fluo-4 491/494 516 1097 AM ester. pH 7.2
DCFH 505 535 529 2'7'Dichorodihydrofluorescein, oxidized form
DHR 505 534 346 Dihydrorhodamine 123, oxidized form, light catalyzes oxidation
SNARF 548/579 587/635 pH 6/9

الپروتينات المفلورة[4]

الصبغة Ex (nm) Em (nm) MW QY BR PS ملاحظات
GFP (Y66H mutation) 360 442
GFP (Y66F mutation) 360 508
EBFP 380 440 0.18 0.27 monomer
EBFP2 383 448 20 monomer
Azurite 383 447 15 monomer
GFPuv 385 508
T-Sapphire 399 511 0.60 26 25 weak dimer
Cerulean 433 475 0.62 27 36 weak dimer
mCFP 433 475 0.40 13 64 monomer
mTurquoise2 434 474 0.93 28 monomer
ECFP 434 477 0.15 3
CyPet 435 477 0.51 18 59 weak dimer
GFP (Y66W mutation) 436 485
mKeima-Red 440 620 0.24 3 monomer (MBL)
TagCFP 458 480 29 dimer (Evrogen)
AmCyan1 458 489 0.75 29 tetramer, (Clontech)
mTFP1 462 492 54 dimer
GFP (S65A mutation) 471 504
Midoriishi Cyan 472 495 0.9 25 dimer (MBL)
Wild Type GFP 396,475 508 26k 0.77
GFP (S65C mutation) 479 507
TurboGFP 482 502 26 k 0.53 37 dimer, (Evrogen)
TagGFP 482 505 34 monomer (Evrogen)
GFP (S65L mutation) 484 510
Emerald 487 509 0.68 39 0.69 weak dimer, (Invitrogen)
GFP (S65T mutation) 488 511
EGFP 488 507 26k 0.60 34 174 weak dimer, (Clontech)
Azami Green 492 505 0.74 41 monomer (MBL)
ZsGreen1 493 505 105k 0.91 40 tetramer, (Clontech)
TagYFP 508 524 47 monomer (Evrogen)
EYFP 514 527 26k 0.61 51 60 weak dimer, (Clontech)
Topaz 514 527 57 monomer
Venus 515 528 0.57 53 15 weak dimer
mCitrine 516 529 0.76 59 49 monomer
YPet 517 530 0.77 80 49 weak dimer
TurboYFP 525 538 26 k 0.53 55.7 dimer, (Evrogen)
ZsYellow1 529 539 0.65 13 tetramer, (Clontech)
Kusabira Orange 548 559 0.60 31 monomer (MBL)
mOrange 548 562 0.69 49 9 monomer
Allophycocyanin (APC) 652 657.5 105 kDa 0.68 heterodimer, crosslinked[5]
mKO 548 559 0.60 31 122 monomer
TurboRFP 553 574 26 k 0.67 62 dimer, (Evrogen)
tdTomato 554 581 0.69 95 98 tandem dimer
TagRFP 555 584 50 monomer (Evrogen)
DsRed monomer 556 586 ~28k 0.1 3.5 16 monomer, (Clontech)
DsRed2 ("RFP") 563 582 ~110k 0.55 24 (Clontech)
mStrawberry 574 596 0.29 26 15 monomer
TurboFP602 574 602 26 k 0.35 26 dimer, (Evrogen)
AsRed2 576 592 ~110k 0.21 13 tetramer, (Clontech)
mRFP1 584 607 ~30k 0.25 monomer, (Tsien lab)
J-Red 584 610 0.20 8.8 13 dimer
R-phycoerythrin (RPE) 565 >498 573 250 kDa 0.84 heterotrimer[5]
B-phycoerythrin (BPE) 545 572 240 kDa 0.98 heterotrimer[5]
mCherry 587 610 0.22 16 96 monomer
HcRed1 588 618 ~52k 0.03 0.6 dimer, (Clontech)
Katusha 588 635 23 dimer
P3 614 662 ~10,000 kDa phycobilisome complex[5]
Peridinin Chlorophyll (PerCP) 483 676 35 kDa trimer[5]
mKate (TagFP635) 588 635 15 monomer (Evrogen)
TurboFP635 588 635 26 k 0.34 22 dimer, (Evrogen)
mPlum 590 649 51.4 k 0.10 4.1 53
mRaspberry 598 625 0.15 13 monomer, faster photobleach than mPlum

الاختصارات:
Ex (nm): Excitation wavelength in nanometers
Em (nm): Emission wavelength in nanometers
MW: Molecular weight
QY: Quantum yield
BR: Brightness: Extinction coefficient * quantum yield / 1000
PS: Photostability: time [sec] to reduce brightness by 50%


. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

التطبيقات

للفلورفورات أهمية خاصة في دراسات الكيمياء الحيوية والپروتينات، مثل في فلورة المناعة ولها أهمية أيضاً في تحليل الخلية، مثل الكيمياء الهستولوجية المناعية.[6] [2]

انظر التقنيات والتطبيقات المفصلة في مقالة الفلورة في العلوم الحياتية.

الاستخدام خارج العلوم الحياتية

هناك أصباغ فلورية إضافية تستخدم على نطاق واسع في الصناعة، تحمل اسم "ألوان النيون"، مثل:

  • multi-ton scale usages in textile dyeing and optical brighteners in laundry detergents
  • advanced cosmetic formulations; safety equipment and clothing
  • الصمامات الثنائية الباعثة للضوء العضوية (OLED)
  • الفنون الجميلة والتصميمات (الملصقات واللوحات)
  • synergists for insecticides and experimental drugs
  • used as a dye in highlighters to give off a glow-like effect
  • الألواح الشمسية (جمع المزيد من الضوء/الأطوال الموجية)

انظر أيضاً

المصادر

  1. ^ Rietdorf J (2005). Microscopic Techniques. Advances in Biochemical Engineering / Biotechnology. Berlin: Springer. pp. 246–9. ISBN 3-540-23698-8. Retrieved 2008-12-13.
  2. ^ أ ب Tsien RY, Waggoner A (1995). "Fluorophores for confocal microscopy". In Pawley JB (ed.). Handbook of biological confocal microscopy. New York: Plenum Press. pp. 267–74. ISBN 0-306-44826-2. Retrieved 2008-12-13.
  3. ^ Lakowicz, JR (2006). Principles of fluorescence spectroscopy (3rd ed.). Springer. p. 954. ISBN 978-0-387-31278-1.
  4. ^ Pingu.salk.edu
  5. ^ أ ب ت ث ج Columbia Biosciences
  6. ^ Taki, Masayasu (2013). "Chapter 5. Imaging and sensing of cadmium in cells". In Astrid Sigel, Helmut Sigel and Roland K. O. Sigel (ed.). Cadmium: From Toxicology to Essentiality. Metal Ions in Life Sciences. Vol. 11. Springer. p. 99115. doi:10.1007/978-94-007-5179-8_5.

وصلات خارجية

تمّ الاسترجاع من "https://www.marefa.org/w/index.php?title=فلوروفور&oldid=1624266"